李文斐

个人信息Personal Information

教授 博士生导师 硕士生导师

主要任职:医学结构生物学中心副主任

性别:女

毕业院校:清华大学

学历:研究生(博士后)

学位:博士生

在职信息:在职

所在单位:基础医学院

入职时间:2021-02-01

学科:生物化学与分子生物学
细胞生物学
生物物理学
遗传学

办公地点:基础医学院电镜楼209

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喜报!实验室 “出道即巅峰” 的第一篇论文,官宣啦!

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博客标题:喜报!实验室 “出道即巅峰” 的第一篇论文,官宣啦!

摘要:基础医学院李文斐教授团队在中科院1区期刊eLife在线发表题为“A simplified and highly efficient cell-free protein synthesis system for prokaryotes”的研究论文。基础医学院博士研究生郎咸圣婕、博士后张长斌为该研究共同第一作者,基础医学院教授李文斐、张哲为共同通讯作者,山东大学为唯一作者单位。

内容:

无细胞蛋白合成(CFPS)技术作为合成生物学的手段,凭借其开放、快速、可编程等独特优势,在mRNA翻译研究、高通量蛋白质工程、体外诊断试剂研发、新型生物制剂制备等领域具有重要应用价值。然而,长期以来,高昂的成本与复杂的体系构成了主要的技术壁垒。在此工作中,团队不仅成功将大肠杆菌无细胞合成体系(eCFPS)的复杂度降至极限,更在简化体系的基础上实现了性能的飞跃,建立了一套极简架构、强劲性能的新一代合成平台。

传统eCFPS系统通常需要多达35种反应组分,且各组分间潜在的抑制性相互作用。此外,核心原料——裂解液的制备流程繁琐,依赖run-off反应和透析等步骤,导致成本高、操作难、稳定性不足。

针对这一问题,李文斐教授团队通过“双重简化”构建高效eCFPS平台:一是经逐级筛选,将核心必需组分精简至7种,显著降低成本并消除组分间潜在抑制作用;二是开发“快速裂解液”制备方案,省去耗时步骤,依托内源代谢酶及残余组分补偿外源组分缺失,提升流程便捷性。

令人惊喜的是,这种“极简”并不牺牲性能——该系统的翻译质量与产量明显优于传统复杂系统,且成功合成了固有毒性内切酶BsaI、易聚集的骨架蛋白Vimentin(可自组装为功能性纤维)。该成果降低了CFPS技术应用门槛,为合成生物学研究及相关产业提供了高效可及的工具,相关成果已申请专利保护。

链接:https://elifesciences.org/reviewed-preprints/109495


发布时间:2025-12-25